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CPHI制藥在線 資訊 如虎添翼!西湖大學開發(fā)全新遞送系統(tǒng),讓CRISPR基因編輯更高效

如虎添翼!西湖大學開發(fā)全新遞送系統(tǒng),讓CRISPR基因編輯更高效

來源:生物世界
  2024-12-03
自誕生以來,CRISPR-Cas9這把"基因魔剪"雖然掀起了生命科學研究的革命性浪潮。然而,面對那些"油鹽不進"的難轉(zhuǎn)染細胞,特別是原代免疫細胞,這把基因魔剪卻常常無處施展。

       自誕生以來,CRISPR-Cas9這把"基因魔剪"雖然掀起了生命科學研究的革命性浪潮。然而,面對那些"油鹽不進"的難轉(zhuǎn)染細胞,特別是原代免疫細胞,這把基因魔剪卻常常無處施展。

       現(xiàn)在,這個難題終于迎來突破性解決方案!西湖凝聚體攜手西湖大學研究團隊重磅推出ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯試劑盒。這款全球首個基于內(nèi)源蛋白凝聚體的轉(zhuǎn)染試劑,采用先進的mRNA遞送技術(shù),開創(chuàng)了非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體的全新遞送策略,不受核酸大小限制,高效遞送Cas9 mRNA,讓原代免疫細胞這樣難轉(zhuǎn)染細胞的基因編輯不再是難題?;赑roteanFect進行免疫細胞基因編輯的成果,也將在本周舉行的美國血液學會(ASH)年會上做口頭報道,期待與各位同行進行交流。

ProteanFect CRISPRMax Cas9試劑盒

       圖1:使用ProteanFect CRISPRMax Cas9試劑盒在人原代T細胞和小鼠原代T細胞中實現(xiàn)高效基因編輯,基因編輯效率范圍為67%-88%。

       CRISPR編輯系統(tǒng)遞送方式對比

CRISPR編輯系統(tǒng)遞送方式對比

       突破性創(chuàng)新:基于ProteanFect內(nèi)源蛋白遞送的mRNA-Based CRISPR Cas9技術(shù)

       創(chuàng)新原理

       面對現(xiàn)有遞送方法的種種局限,西湖凝聚體開發(fā)出基于生物分子凝聚體的全新遞送技術(shù)——ProteanFect。這項技術(shù)的核心在于充分利用生物凝聚體的天然生物學機制:ProteanFect蛋白分子能夠在體外與核酸自組裝成高度規(guī)律的球體結(jié)構(gòu)(見圖2)。

圖2:ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒。

       圖2:ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒。

       這種自組裝而成的ProteanFect-核酸復合物能夠通過細胞的主動攝入高效進入細胞內(nèi),迅速釋放核酸分子,實現(xiàn)基因表達,同時天然降解其余蛋白(圖3)。

圖3:ProteanFect核酸遞送原理示意圖

       圖3:ProteanFect核酸遞送原理示意圖

       ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯方式

       1. 通過共轉(zhuǎn)染Cas9 mRNA與sgRNA,成功表達Cas9蛋白。

       2. Cas9蛋白與sgRNA在細胞內(nèi)自組裝形成RNP復合物。

       3. RNP復合物進入細胞核并實現(xiàn)高效基因編輯。

圖4:ProteanFect基因編輯方式原理示意圖

       圖4:ProteanFect基因編輯方式原理示意圖

       ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯卓越優(yōu)勢

       高效性能- 轉(zhuǎn)染效率可達70%-95%,可同時遞送多種核酸,共表達率超90%,適用于人源和小鼠原代免疫細胞

       卓越安全性- 非病毒、非電轉(zhuǎn)、非脂質(zhì)體設(shè)計 - 基于內(nèi)源蛋白,生物相容性極 佳 - 顯著降低細胞損傷

       操作便捷- 標準化的實驗流程 - 無需復雜的預(yù)處理步驟 - 可重復性高

       系統(tǒng)靈活 – 不受細胞數(shù)量限制,從103– 108次細胞都可以轉(zhuǎn)染

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