在免疫學(xué)研究中，免疫健全的小鼠模型是探索免疫系統(tǒng)功能和疾病機(jī)制的關(guān)鍵工具。然而，小鼠原代免疫細(xì)胞的基因編輯一直是技術(shù)難點(diǎn)。為突破這一瓶頸，西湖大學(xué)聯(lián)合西湖凝聚體團(tuán)隊(duì)成功開發(fā)了一種全新的基因遞送系統(tǒng)——ProteanFect CRISPRMax小鼠免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒，基于創(chuàng)新的內(nèi)源蛋白凝聚體技術(shù)，顯著提高了基因編輯效率和細(xì)胞存活率，為免疫學(xué)和基因編輯研究提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
不同基因遞送方法方法在小鼠原代免疫細(xì)胞中的功能比較
用戶親證：ProteanFect CRISPRMax在小鼠原代T細(xì)胞實(shí)現(xiàn)97%高效基因編輯
陸軍軍醫(yī)大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)使用 ProteanFect CRISPRMax 在小鼠原代 T 細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染 Cas9 mRNA、sgRNA 和 EGFP-mRNA，成功實(shí)現(xiàn)：
● 高轉(zhuǎn)染效率– 在 EGFP 陽性 T 細(xì)胞中，97% 的細(xì)胞未檢測到目標(biāo)基因表達(dá)，提示基因敲除效果顯著。
● 高效共轉(zhuǎn)– 通過 EGFP、Puro 等篩選標(biāo)簽，精準(zhǔn)富集成功基因編輯的細(xì)胞。
● 低細(xì)胞毒性– 細(xì)胞生存率高，且生理功能未受影響。
圖1： ProteanFect CRISPRMax實(shí)現(xiàn)在小鼠原代T細(xì)胞的高效基因編輯
ProteanFect 何以如此高效？
ProteanFect 創(chuàng)新基因遞送方式
ProteanFect CRISPRMax采用了一種創(chuàng)新的生物分子凝聚體技術(shù)：ProteanFect 通過將蛋白分子和核酸自組裝成一種規(guī)則的納米顆粒，這些納米顆粒能夠通過細(xì)胞的主動內(nèi)吞機(jī)制進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。這些顆粒穩(wěn)定而功能強(qiáng)大，可以保護(hù) mRNA 免受降解并保持其活性。此外，這種設(shè)計(jì)無需額外的化學(xué)修飾，從而減少了細(xì)胞毒性，顯著提升實(shí)驗(yàn)的安全性。
圖2：ProteanFect蛋白分子與mRNA可在體外自組裝形成蛋白納米顆粒
ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯原理
1、通過共轉(zhuǎn)染 Cas9 mRNA 與 sgRNA，成功表達(dá) Cas9 蛋白。
2、Cas9 蛋白與 sgRNA 在細(xì)胞內(nèi)自組裝形成 RNP 復(fù)合物。
3、RNP 復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核并實(shí)現(xiàn)高效基因編輯。
圖3：ProteanFect核酸遞送原理示意圖
圖4：使用ProteanFect CRISPRMax Cas9試劑盒在人原代T細(xì)胞和小鼠原代T細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高效基因標(biāo)記，基因編輯效率范圍為67%-88%。
即用型CRISPR基因編輯試劑盒，讓實(shí)驗(yàn)更高效！
ProteanFect CRISPRMax 一體化設(shè)計(jì)，助力高效基因編輯
● Cas9 mRNA & sgRNA 同步遞送，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)編輯
● 優(yōu)化編輯窗口期，提高基因敲除效率
● 適用于人源 & 小鼠原代 T 細(xì)胞，靈活應(yīng)對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞
● 標(biāo)準(zhǔn)化試劑盒，輕松上手，無縫銜接您的實(shí)驗(yàn)流程！
圖5：ProteanFect CRISPRMax轉(zhuǎn)染試劑盒成分表
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