CAR-T，即嵌合抗原受體-T細胞（Chimeric Antigen Receptor T-cell），其中CAR是一種人工構建的細胞表面受體，由能夠識別腫瘤抗原的胞外單鏈抗體可變區和胞內信號傳導區域組成。T細胞過(guò)表達CAR分子后，能識別癌細胞表面的腫瘤抗原并被激活，從而特異性殺傷腫瘤細胞。

CAR-T產(chǎn)品治療過(guò)程

　　自從2017年8月首個(gè)CAR-T細胞產(chǎn)品Kymriah獲FDA批準上市以來(lái)，這一療法在短短數年間進(jìn)行了多次迭代。

      然而，當前的CAR-T產(chǎn)品，無(wú)論是自體還是通用型，均是體外CAR-T療法（ex vivo CAR-T），需要從患者身上收集細胞，并在體外對這些細胞進(jìn)行改造及培養，最后再將CAR-T細胞重新回輸到患者體內，因此面臨生產(chǎn)、運輸、安全挑戰、價(jià)格高昂等多重挑戰。在這種背景下，如何使CAR-T療法變得更完美，成為藥企的主旋律。近日，阿斯利康一筆高達10億美元的交易，使得體內CAR-T療法（in vivo CAR-T）再次被點(diǎn)燃。

　　110億美元,阿斯利康豪賭體內CAR-T

      3月17日，阿斯利康宣布，以總對價(jià)10億美元（約72.4億元人民幣）收購比利時(shí)生物技術(shù)公司EsoBiotec，創(chuàng )下本年度細胞與基因治療（CGT）領(lǐng)域最高收購金額。EsoBiotec成立于2020年，是專(zhuān)注于體內CAR-T領(lǐng)域的新銳公司。其獨有的工程納米抗體慢病毒（ENaBL）平臺，為癌癥治療領(lǐng)域帶來(lái)了創(chuàng )新性突破。ENaBL以具備免疫屏蔽特性的慢病毒作為載體，這類(lèi)載體能有效抵御免疫系統攻擊，確保將遺傳指令精準傳遞至T細胞，從而在體內高效地將T淋巴細胞重編程為特定功能細胞。

      依托ENaBL平臺，EsoBiotec已布局四條臨床候選管線(xiàn)，其中針對多發(fā)性骨髓瘤的候選管線(xiàn)ESO-T01（BCMA CAR-T）已進(jìn)入臨床研究階段。ESO-T01可精準識別并緊密結合表達BCMA的腫瘤細胞，激活免疫反應以殺傷腫瘤，展現出極高的精度與效力。此次收購完成后，EsoBiotec將成為阿斯利康的全資子公司，在比利時(shí)開(kāi)展業(yè)務(wù)。

      在收購EsoBiotec之前，阿斯利康于2023年底，更是豪擲12億美元收購亙喜生物。亙喜生物針對CAR-T行業(yè)的諸多瓶頸，開(kāi)發(fā)出了FasTCAR次日生產(chǎn)技術(shù)平臺，該平臺可將傳統工藝長(cháng)達數周的生產(chǎn)周期大幅縮減至次日，并且能夠強化T細胞健康狀態(tài)，以及節省治療費用等，有望為CAR-T細胞療法的生產(chǎn)及臨床應用帶來(lái)重要變革。2022年，FasTCAR自體CAR-T技術(shù)平臺被正式評選為2022年Fierce Life Sciences年度創(chuàng )新獎之“生物技術(shù)創(chuàng )新獎”。

      亙喜生物基于FasTCAR平臺打造的BCMA/CD19雙靶點(diǎn)CAR-T療法GC012F備受關(guān)注，也是吸引阿斯利康收購的重要因素。GC012F可同時(shí)靶向B細胞成熟抗原（BCMA）和CD19雙靶點(diǎn)，目前研究者已發(fā)起多項臨床試驗，包括評估其治療復發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤（RRMM）、初診多發(fā)性骨髓瘤（NDMM）以及B細胞非霍奇金淋巴瘤的安全性和有效性等，另外還在中美兩地獲批用于治療難治性系統性紅斑狼瘡適應癥的臨床試驗。

      除了外部BD獲得的CAR-T產(chǎn)品外，阿斯利康還自研或合作開(kāi)發(fā)了CAR-T產(chǎn)品AZD7003（靶向GPC3）、AZD0754（靶向Steap2）和AZD6422（靶向Claudin18.2）。雖然阿斯利康在CAR-T賽道入局并不算早，但其正在用實(shí)際行動(dòng)展示押注下一代CAR-T技術(shù)的決心。那么，關(guān)于阿斯利康押注的體內CAR-T技術(shù)，目前研發(fā)進(jìn)展如何？

　　改變游戲規則的體內CAR-T,多家藥企競逐

      體內CAR-T是指通過(guò)保護性載體，將嵌合抗原受體（CAR）分子載送至患者T細胞內，并讓這些T細胞在體內自動(dòng)轉化為CAR-T細胞。與傳統CAR-T療法相比，體內CAR-T不需要從患者體內提取CAR-T細胞，也不需要提前進(jìn)行淋巴細胞清除的預處理，不僅整個(gè)治療等待時(shí)間更少，而且無(wú)需專(zhuān)門(mén)的定制化處理。

      在安全性上，由于CAR-T細胞來(lái)自患者自身，大幅降低了“通用型CAR-T”常見(jiàn)的細胞因子釋放綜合征等發(fā)生風(fēng)險。

      鑒于一系列優(yōu)勢，體內CAR-T可能會(huì )改變全球市場(chǎng)的游戲規則，吸引了MNC和Biotech競相布局。由于體內CAR-T是通過(guò)不同的手段直接在體內進(jìn)行基因修改，因此如何將編碼CAR的基因或mRNA精準高效地遞送至患者體內的T細胞，并且不影響其他細胞，是該技術(shù)開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵。

      目前，常用的遞送系統包括病毒載體、mRNA遞送系統（LNP）以及基因編輯技術(shù)，以前兩種為主。目前，以病毒載體為遞送手段的代表公司有Interius BioTherapeutics、Umoja Biopharma和Kelonia Therapeutics等。Interius BioTherapeutics（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“Interius”）是全球體內CAR-T研發(fā)進(jìn)度最快的公司之一。

      去年7月，公司在研體內CAR-T療法INT2104宣布獲澳大利亞治療用品管理局（TGA）批準進(jìn)入臨床試驗，用于治療B細胞惡性腫瘤。INT2104是一種慢病毒載體基因療法，設計靶向CD7陽(yáng)性的T細胞和NK細胞，并傳遞CAR轉基因，以在體內生成效應CAR-T和CAR-NK細胞。這些CAR細胞靶向CD20陽(yáng)性B細胞，用于治療B細胞惡性腫瘤。據悉，INT2104是首個(gè)進(jìn)入人體臨床試驗的體內CAR-T療法。

      INT2104設計示意圖

　　Umoja Biopharma（簡(jiǎn)稱(chēng)Umoja）擁有四大核心技術(shù)平臺：VivoVec采用專(zhuān)有的第三代慢病毒載體技術(shù)，可使人體自行制造CAR-T細胞；RACR/CAR能夠對體內細胞進(jìn)行編程，促進(jìn)體內產(chǎn)生的CAR-T細胞長(cháng)期存活和擴張；iCIL利用RACR技術(shù)從誘導的多能干細胞中大規模生產(chǎn)合成抗癌細胞，增強內源性抗腫瘤免疫功能；TumorTag通過(guò)將通用CAR與離體制造的細胞結合，提高了靶向靈活性。

VivoVec平臺作用機制

　　Umoja基于VivoVec平臺，研發(fā)了體內CAR-T療法UB-VV111（靶向CD19），該產(chǎn)品已在去年7月底獲FDA批準，進(jìn)入臨床試驗，用于血液瘤治療。

      在此之前，艾伯維已和Umoja達成獨家合作協(xié)議，以使用Umoja專(zhuān)有的VivoVec平臺開(kāi)發(fā)CAR-T細胞療法候選藥物。該交易總金額高達14.4億美元。Kelonia Therapeutics（簡(jiǎn)稱(chēng)Kelonia）對傳統的慢病毒載體（LVV）進(jìn)行了修飾，其iGPS技術(shù)建立在LVV的基礎上，在病毒包膜上采用了獨特定義iGPS粒子特異性的靶向分子和優(yōu)化的融合蛋白（fusogen）設計，在目標免疫細胞識別出LVV表面特殊抗原并與之結合后，促融合分子才會(huì )對免疫細胞進(jìn)行轉導，進(jìn)行基因遞送，提高了基因遞送的精確性和高效性。

      2024年2月，安斯泰來(lái)與Kelonia達成合作協(xié)議，將利用Kelonia的iGPS技術(shù)，來(lái)開(kāi)發(fā)針對至多兩個(gè)項目的創(chuàng )新體內CAR-T細胞療法。目前在研CAR-T產(chǎn)品大多采用病毒載體，雖然這可使疾病獲得長(cháng)期緩解，但病毒載體具有制作成本高以及致癌風(fēng)險等，因此，在體內CAR-T研發(fā)中，非病毒載體的技術(shù)突破已成為關(guān)鍵。目前非病毒載體主要代表是脂質(zhì)納米顆粒（LNP），其具有可大量生產(chǎn)、免疫原性低的優(yōu)點(diǎn)，而且不插入基因組因而避免了基因突變風(fēng)險。

       LNP技術(shù)曾在新冠疫苗中大放異彩，而今被迅速應用到CAR-T領(lǐng)域。Capstan Therapeutics公司開(kāi)發(fā)了抗體偶聯(lián)的LNP（Cellscope平臺），利用特異性的抗CD8抗體修飾，將載有CAR mRNA的脂質(zhì)納米顆粒靶向遞送至T細胞。

      這種策略能在體內快速將患者的T細胞轉化成為CAR-T細胞。Capstan因此被行業(yè)媒體Endpoints News評為“2024生物醫藥最 具潛力新銳”。2024年3月，Capstan完成了1.75億美元的B輪融資，投資者陣容豪華，強生、BMS、禮來(lái)、拜耳、諾華、輝瑞等制藥巨頭均現身。除Capstan外，Myeloid Therapeutics、Orbital和Orna等公司均利用LNP遞送RNA技術(shù)，以誘導靶細胞中CAR表達的短暫激增。目前全球已有多個(gè)體內CAR-T候選產(chǎn)品已經(jīng)或即將進(jìn)入臨床。

　　關(guān)于CAR-T治療我們在追求什么？

      CAR-T技術(shù)從開(kāi)發(fā)至今經(jīng)歷了數次迭代，對于CAR-T治療，行業(yè)一直在追求極 致的路上。

      對于體外CAR-T來(lái)說(shuō)，如何縮短生產(chǎn)時(shí)間，簡(jiǎn)化制備過(guò)程，降低高昂的成本、物流費用等是藥企亟需解決的問(wèn)題。

      另外，對于一些T細胞質(zhì)量或數量較差的患者，體外改造可能并不適用。對于體內CAR-T來(lái)說(shuō)，如何提高載體的安全性依然是面臨的主要挑戰，其次是如何在治療窗口期內確保足夠的表達和免疫激活。除此之外，由于體內環(huán)境復雜，如何在體內生成并維持具有長(cháng)期持久性的CAR-T細胞群體，也是體內CAR-T面臨的一個(gè)重要挑戰。

      無(wú)論對于體外還是體內CAR-T，目前主要陣地仍是血液瘤，下一步，適應癥拓展是關(guān)鍵，如實(shí)體瘤、自免等其他未滿(mǎn)足大量需求的適應癥。

      總之，CAR-T技術(shù)融合了基因編輯、載體工程、分子靶向等多方面尖端技術(shù)。誠然，和所有革命性發(fā)明一樣，CAR-T藥物并不完美，至今也仍然在持續優(yōu)化的道路上。通過(guò)不斷優(yōu)化遞送工具和靶向策略，藥企正逐步攻克CAR-T療法的技術(shù)壁壘。隨著(zhù)這些創(chuàng )新的積累，有望掀開(kāi)細胞治療的新篇章。